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BIOHUB無血清細胞凍存液說明書

更新時間:2023-10-24      點擊次數(shù):402

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產(chǎn)品描述
細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù),是細胞長期保存的重要手段。細胞凍存液通過冷凍保護劑在凍存過程中對細胞進行保護,以減少或防止冷凍冰晶對細胞造成的損傷。
BIOHUB 無血清細胞凍存液(藥用級)是一款采用醫(yī)用原料無血清、無需程序降溫的細胞凍存液,廣泛適用于多種哺乳動物細胞(腫瘤細胞和常規(guī)細胞)的凍存。該凍存液特別優(yōu)化的配方含有雙重保護細胞的成份,從細胞內(nèi)和細胞外同時保護細胞免受凍存時冰晶的損傷,大大提高了細胞的復(fù)蘇率和活力,可用于細胞長期保存。該產(chǎn)品配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。
與傳統(tǒng)凍存液相比,本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風險,同時,可省去繁瑣費時的程序降溫過程,細胞可重懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長期保存,或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個凍存過程。
產(chǎn)品性質(zhì)
該產(chǎn)品已通過嚴格的內(nèi)毒素、滲透壓、pH 測試和無菌檢測(細菌、真菌和支原體檢測)。成分明確,極大降低批次間差異
產(chǎn)品特點
1、即用型細胞凍存液——優(yōu)化的wan全營養(yǎng)成分配方,不需要逐次用多種試劑自行配制凍存液
2、直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5 年),不需要程序性降溫
3、高安全性,病毒、病菌和支原體等污染可能性低——不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌病毒和支原體等污染
使用方法
使用方法
一 凍存細胞復(fù)蘇步驟
  1. 選擇處于指數(shù)生長期的細胞,按照常規(guī)方法收集貼壁細胞或懸浮細胞于離心管中。

  2. 1000 rpm-2000 rpm,離心 5 分鐘,收集培養(yǎng)細胞沉淀,棄上清液。

  3. 加入適量 4℃預(yù)冷的 BIOHUB 無血清細胞凍存液重懸細胞,制成細胞懸液。 (按照細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量,推薦凍存密度:1x106 至 5x106cells/mL。)

  4. 將細胞懸液分裝至已標記的凍存管中,建議每管 1mL 或 1.5mL。

直接將細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。如果想放入液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少 12 小時,方可移至液氮罐中長期保存。
二  凍存細胞復(fù)蘇步驟
  1. 在 15 mL 離心管中加入 5-10 mL 平衡至室溫的wan全培養(yǎng)基。

  2. 從-80℃冰箱/液氮中取出凍存的細胞,立即放入 37℃水浴鍋或其他細胞復(fù)蘇設(shè)備中,迅速解凍。

  3. 將凍存管中的細胞懸液逐滴轉(zhuǎn)移至預(yù)先準備好的含wan全培養(yǎng)基的離心管中,1000 rpm-1500 rpm,離心 5 分鐘,收集細胞沉淀,棄上清(操作時小心,切勿將細胞沉淀移去)。

  4. 加入適量平衡至室溫的wan全培養(yǎng)基重懸細胞,接種到事先準備好的培養(yǎng)容器中,輕輕搖晃培養(yǎng)容器,使細胞分布均勻。

  5. 鏡檢細胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法進行細胞常規(guī)培養(yǎng)。培養(yǎng) 5-24h 后,觀察細胞狀態(tài),可視情況更換鮮細胞培養(yǎng)液。

實驗案例分析
1.選擇處于對數(shù)生長期的四種細胞,按照常規(guī)方法收集細胞于離心管中。
2.1000 rpm,離心 5 分鐘,收集培養(yǎng)細胞沉淀,棄上清液。
3.加入適量 4℃預(yù)冷的 BIOHUB 無血清細胞凍存液、T 公司凍存液、X 公司凍存液分別重懸細胞,制成細胞懸液。凍存密度為 1x106 cells/mL。
4.將細胞懸液分裝至已標記的凍存管中,每管 1mL,放入-80℃冰箱中,冷凍保存。
5.凍存 6 個月后,進行細胞復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細胞進行臺盼藍染色,統(tǒng)計細胞存活率。

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細胞凍存 6 個月后復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細胞進行臺盼藍染色,統(tǒng)計細胞存活率

運輸及保存方法
保存:短期:2-8℃ 6 個月;長期-20℃保存,24 個月。
運輸:冰袋運輸。


注意事項
  1. 本產(chǎn)品可-30℃至-10℃保存,若長期不用,再次使用時,請在 2-8℃或室溫(22-25℃,不超過 4小時)融化 ;

  2. 避免反復(fù)凍融;

  3. 使用此無血清細胞凍存液凍存細胞后,應(yīng)盡量減少凍存細胞在外存放時間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存;

  4. BIOHUB 無血清細胞凍存液(藥用級)含有 DMSO,部分對 DMSO 敏感的細胞、淋巴細胞或干細胞凍存,建議使用本產(chǎn)品對其進行試驗性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng),確認性能后再進行正式凍存;

  5. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長,以免影響凍存效率;

免責聲明: 本公司將不為任何不正當使用此產(chǎn)品所發(fā)生的意外負責;為了您的健康安全,請規(guī)范操作,穿戴實驗服與手套開展實驗;
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療


貨號品名規(guī)格品牌
78EC10001-100ml無血清細胞凍存液100mlBIOHUB
78EC10001-500ml無血清細胞凍存液500mlBIOHUB






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