固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使酶失活。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、ku味酸鹽類固定液等,較常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
Bouin's固定液(Bouin's Fluid)主要由飽和PA、甲醛、乙酸混合而成,PA可沉淀蛋白引起組織收縮,但不會使組織硬化,其與甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均勻,組織收縮輕微,對細胞的微細結(jié)構(gòu)顯示的很清晰,為一種良好的固定液。尤其對Masson三色法等的結(jié)締組織和肌纖維染色有媒染作用,經(jīng)其固定后的組織著色鮮艷。該固定液也可能軟化皮膚和肌腱,以利于切片。
1、一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當(dāng)延長固定時間,但不宜超過24h。
2、用Bouin's固定液固定后,組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉(zhuǎn)入70%的乙醇脫水,經(jīng)乙醇脫水時可除去大部分PA,組織留有一點黃色,對染色也無影響。
活檢標本的固定、媒染劑、適用于脂肪較多的組織標本。浮游生物及其他生物組織的固定,用于保存和觀察。
1、Bouin's固定液對人體有一定的損害,請在通風(fēng)好的環(huán)境下小心操作,避免吸入。
2、組織取材的厚度不同,固定時間也不同,對組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。常規(guī)活檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過6mm。
3、固定液的容量應(yīng)足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
4、溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但溫度不宜過高。
5、取出新鮮組織后,應(yīng)及時固定,無法及時固定時,應(yīng)保存于生理鹽水中及時送檢。
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
78GG10007-100mL | Bouin's固定液,BR | 100mL | BIOHUB |
78GG10007-500mL | Bouin's固定液,BR | 500mL | BIOHUB |