如果不能短期內(nèi)使用完畢,解凍后請(qǐng)適當(dāng)分裝。血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此在分裝血清時(shí)須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間,否則易導(dǎo)致分裝瓶?jī)隽讯l(fā)生污染。
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已wan全解凍的血清。加熱過(guò)程中需有規(guī)則地?fù)u晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補(bǔ)體 (complement)。除非必須,一般不推薦對(duì)血清進(jìn)行熱處理。因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與的反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用、平滑肌細(xì)胞收縮、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺、增強(qiáng)吞噬作用、促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化等。
瓶裝血清解凍需采用緩慢解凍法:把在-15~-40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解凍約1天,待全部解凍后再分裝。在解凍過(guò)程中每隔約2小時(shí)可輕輕搖晃均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃或更低溫度進(jìn)入37℃水浴解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,從而使用血清的質(zhì)量下降。
血清中的絮狀沉淀物主要是解凍后血清中纖維蛋白及4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的脂蛋白變性造成的,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可不用處理。如果必須要處理,可400g離心5分鐘去除。但不宜過(guò)濾去除,因?yàn)樾鯛钗锟赡茏枞麨V膜。
經(jīng)過(guò)熱處理的血清中沉淀物會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點(diǎn)",而且由于這些“小黑點(diǎn)"的布朗運(yùn)動(dòng)在顯微鏡下被放大,感覺(jué)是在游動(dòng),所以經(jīng)常被誤認(rèn)為血清被微生物污染。通常這些小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清存在微生物污染,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批次的血清??蓪⑦m量血清用培養(yǎng)液稀釋至10%濃度后培養(yǎng)1-3天,觀察小黑點(diǎn)是否急劇增多,或取適量血清在LB平板上涂板培養(yǎng)觀察是否產(chǎn)生菌落,以確定是否存在微生物污染。
請(qǐng)勿將血清在37℃放置過(guò)長(zhǎng)時(shí)間,否則血清會(huì)逐漸變渾濁,同時(shí)血清中的有效成分也會(huì)逐漸失活而影響血清質(zhì)量。
如果對(duì)本血清產(chǎn)品質(zhì)量有任何疑問(wèn),請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系碧云天,并保留原包裝瓶和產(chǎn)品標(biāo)簽以備申訴。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。