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磺基-SMCC鈉鹽 Sulfo-SMCC sodium說明書

更新時間:2023-10-24      點擊次數:424

磺基-SMCC鈉鹽 Sulfo-SMCC sodium說明書

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產品描述

4-(N-馬來酰亞胺甲基)環(huán)己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亞胺酯鈉鹽(4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexane-1- carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt,縮寫Sulfo-SMCC)是水溶性版本的SMCCCat#MM3701-25MG),由于活性酯上磺酸基的引入賦予其一定的水溶性,使其在不含DMSO或者DMF等有機溶劑體系內進行標記成為可能。

SMCC和水溶性類似物Sulfo-SMCC是異型雙功能交聯劑,包含一個胺基反應性的N-羥基琥珀酰亞胺(NHS ester)和巰基反應性的馬來酰亞胺基團。NHS酯與伯胺(pH 7-9)反應形成穩(wěn)定的酰胺鍵。馬來酰亞胺與巰基反應(pH 6.5-7.5)形成穩(wěn)定的硫醚鍵。水溶性溶液中,NHS酯的水解降解是競爭性反應,隨著pH提高,降解速率增高。馬來酰亞胺基團比NHS酯穩(wěn)定些,但在pH>7.5的體系內會緩慢水解并且喪失對巰基的反應特異性。因此,這些交聯劑的偶聯反應通常在pH 7.2-7.5的范圍內進行,可先進行NHS酯(胺基指向)反應或同時進行NHS酯(胺基指向)和馬來酰亞胺(巰基指向)反應。

由于SMCCSulfo-SMCC間隔臂上的環(huán)己烷橋降低了馬來酰亞胺基團的水解速率,這一特征使得用SMCCSulfo-SMCC所得馬來酰亞胺活化的蛋白能夠被凍干且保存,之后用于標記含巰基的分子。SMCCSulfo-SMCC通常以二步法的方式制備抗體-酶和半抗原-載體蛋白復合物。首先,含胺基的蛋白與數倍摩爾級的交聯劑反應,通過脫鹽或透析的方式去除多余(未反應)試劑;其次,含巰基的分子加入與已偶聯在第一個蛋白上的馬來酰亞胺基反應。

產品性質

同義名:Sulfosuccinimidyl 4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate sodium salt; Sulfo-SMCC sodium salt; 磺基-SMCC鈉鹽;4-(N-馬來酰亞胺甲基)環(huán)己烷-1-羧酸3-磺基-N-羥基琥珀酰亞胺酯 鈉鹽CAS NO:92921-24-9分子式:C16H17N2NaO9S純度:≥95%分子量:436.37 g/mol外觀:白色至類白色粉末溶解性:溶于水(2.5mg/ml)

使用方法
實驗案例分析
溶解性數據
In Vitro:

DMSO : 125 mg/mL (286.45 mM; Need ultrasonic)

H2O : 5 mg/mL (11.46 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C)

配制儲備液
濃度溶劑體積質量1 mg5 mg10 mg
1 mM2.2916 mL11.4582 mL22.9163 mL
5 mM0.4583 mL2.2916 mL4.5833 mL
10 mM0.2292 mL1.1458 mL2.2916 mL
*

請根據產品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液;一旦配成溶液,請分裝保存,避免反復凍融造成的產品失效。
儲備液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 儲存時,請在 6 個月內使用,-20°C 儲存時,請在 1 個月內使用。

In Vivo:

請根據您的實驗動物和給藥方式選擇適當的溶解方案。以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液,再依次添加助溶劑:

——為保證實驗結果的可靠性,澄清的儲備液可以根據儲存條件,適當保存;體內實驗的工作液,建議您現用現配,當天使用; 以下溶劑前顯示的百
分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比;如在配制過程中出現沉淀、析出現象,可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

  • 1.


    請依序添加每種溶劑: PBS

    Solubility: 4.17 mg/mL (9.56 mM); Clear solution; Need ultrasonic and warming and heat to 60°C


  • 2.


    請依序添加每種溶劑: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM); Clear solution


    此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM,飽和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 400 μL PEG300 中,混合均勻;向上述體系中加入50 μL Tween-80,混合均勻;然后繼續(xù)加入 450 μL生理鹽水定容至 1 mL。

  • 3.


    請依序添加每種溶劑: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM); Clear solution


    此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM,飽和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理鹽水水溶液中,混合均勻。

  • 4.


    請依序添加每種溶劑: 10% DMSO    90% corn oil

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM); Clear solution


    此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL (4.77 mM,飽和度未知) 的澄清溶液,此方案不適用于實驗周期在半個月以上的實驗。

    以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL玉米油中,混合均勻。

注意事項

1)SMCCSulfo-SMCC對濕度敏感,需干燥保存。開瓶前需平衡至室溫,稱取所需量的粉末去溶解,并立即使用(以防水解發(fā)生)。丟掉任何未使用的重溶溶液,不要保存后再用。

2)最初溶解Sulfo-SMCC不要使用生理緩沖鹽溶液,因其在超過50mM總鹽的緩沖液內溶解性不是很好。不過,一旦粉末溶解后,可以將其稀釋到PBS或其他不含伯胺的緩沖液中。

5SMCC不溶于水,必須先溶于有機溶劑比如DMSODMF內,之后稀釋到水溶性反應緩沖液內。如果有機溶劑的最終含量10%,大多數的蛋白反應產物都是保持可溶的。

6)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


貨號品名規(guī)格品牌
78GG10045-10mg磺基-SMCC鈉鹽 Sulfo-SMCCsodium10mgBIOHUB
78GG10045-50mg磺基-SMCC鈉鹽 Sulfo-SMCCsodium50mgBIOHUB
78GG10045-100mg磺基-SMCC鈉鹽 Sulfo-SMCCsodium100mgBIOHUB




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