本酶為 HotStart LA Taq DNA 聚合酶,需 95 度加熱 5 分鐘或 98 度加熱 2 分鐘而激活。LA Taq DNA 聚合酶在Taq酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行了基因工程改造,含有一段雙鏈DNA結(jié)合蛋白,可以顯著提高聚合酶的延伸能力和延伸速度。因此,LA Taq DNA聚合酶非常適合于擴(kuò)增長片段DNA,擴(kuò)增片段的長度可達(dá) 5-8 kb,延伸速度為 3-4 kb/ min(72℃)。本酶是大腸桿菌重組表達(dá)的DNA 聚合酶,分子量為 107 kDa。該酶具有 5’→3’聚合酶活性,較弱的 5’→3’外切酶活性;無 3’→5’ 外切酶活性。擴(kuò)增產(chǎn)物具有 3'-dA 尾巴。
以大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物,在 72℃、30 min 內(nèi),將 10 nmole 脫氧核糖核苷酸摻入到酸不溶物中所需的酶量,定義為一個活性單位(U)。
特點
? 本酶為熱啟動聚合酶,可提高擴(kuò)增的特異性,減少非特異性擴(kuò)增和引物二聚體;
? 經(jīng)特殊改造,擴(kuò)增能力強(qiáng),4kb/min 延伸條件下可有效擴(kuò)增 3-5kb 的 DNA 片段;
? 酶的熱穩(wěn)定性有一定程度提高,可以采用 98 度 2 分鐘預(yù)變性;
? 可在 60-72 度下進(jìn)行兩步法 PCR,縮短整個 PCR 時間。
? PCR 產(chǎn)物具有 3’-dA 尾巴,可直接用于 T/A 克??;
? 可以摻入 dUTP、dITP、熒光標(biāo)記核苷酸。
適用范圍
? 熱啟動 PCR 擴(kuò)增
? Multiplex PCR
? 菌落PCR
? TA 克隆 PCR 產(chǎn)物添加 3’-dA
? DNA 熒光標(biāo)記
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
78DC10166-250U | HS LA Taq DNA Polymerase(dNTP) | 250U | Biohub |
78DC10166-250U×5 | HS LA Taq DNA Polymerase(dNTP) | 250U×5 | Biohub |
78DC10166-1250U×4 | HS LA Taq DNA Polymerase(dNTP) | 1250U×4 | Biohub |
78DC10166-2500U×5 | HS LA Taq DNA Polymerase(dNTP) | 2500U×5 | Biohub |