自備蘇木素分化液(推薦 78NB10002)、蘇木素返藍液(推薦 78NB10003)、二甲苯、梯度乙醇、無水乙醇、中性樹 膠等。
1.樣本前處理
(1) 對于石蠟切片:切片依次經(jīng)二甲苯脫蠟 10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟 10 min,無水乙醇 5min,新 鮮無水乙醇 5 min,90%乙醇 5 min,75%乙醇 5 min,自來水洗。
(2) 對于冰凍切片:-20℃保存的冰凍切片需靜置 5-10 min 恢復至室溫。
2. 蘇木素染色
上述處理好的切片,直接進入蘇木素染液染色 3-5 min,自來水洗;再經(jīng)蘇木素分化液 2-5 s,自來水 洗;蘇木素返藍液返藍 2-5 s,自來水沖洗。鏡下觀察細胞核呈藍色,組織背景近乎無色。然后切片依次經(jīng) 70%、80%、95%、100%乙醇脫水,各 3 min 左右。切片再經(jīng)新鮮無水乙醇脫水 3 min,二甲苯透明 5 min, 更換新鮮的二甲苯再透明 5 min。最后用中性樹膠封片。 注:如果用于免疫組化等染色后的復染,請在其他染色完成后再進行伊紅染色。
2. 染液表面有少量氧化膜為正?,F(xiàn)象,不影響染色結(jié)果。如果染液表面出現(xiàn)大量氧化膜,建議更換新的 蘇木素染液。
3. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。