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簡(jiǎn)要描述:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑 6G,是一種新型多功能的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA和RNA)轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞,具有低細(xì)胞毒性;對(duì)多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染時(shí)血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)證明可以將各種有效載荷有效地轉(zhuǎn)染到各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中。
產(chǎn)品分類
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品牌 | BIOHUB | 供貨周期 | 兩周 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑 6G,是一種新型多功能的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA和RNA)轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞,具有低細(xì)胞毒性;對(duì)多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染時(shí)血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)證明可以將各種有效載荷有效地轉(zhuǎn)染到各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中。研究人員將 Lipofectamine 6G 試劑用于質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染以及基于 siRNA 和 shRNA 的基因敲除實(shí)驗(yàn)、基因表達(dá)研究。
• 超高的性價(jià)比,為您節(jié)省更多的實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
運(yùn)輸及保存方法
2-4℃保存,有效期?年。(避免冷凍)
產(chǎn)品應(yīng)用及說(shuō)明
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),DNA(µg)與Lipofectamine 6G (µl)的比例為1:2~1:3。轉(zhuǎn)染時(shí)高的細(xì)胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)水平,并能減少細(xì)胞毒性。 1. 以24孔板為例 貼壁細(xì)胞: 轉(zhuǎn)染前一天,用500 µl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5~2×105細(xì)胞,使之第二天能達(dá)到70-90%匯合。 懸浮細(xì)胞:在準(zhǔn)備Lipofectamine 6G復(fù)合物之前,用500 µl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4~8×105細(xì)胞即可。 2. 對(duì)每個(gè)轉(zhuǎn)染樣品,進(jìn)行以下操作 a. 在eppendorf管里分別加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA輕柔混勻,制成DNA稀釋液。 b. 在另一個(gè)eppendorf管里分別加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl Lipofectamine 6G (注意用前先混勻),輕柔混勻,制 成Lipofectamine 6G 稀釋液,室溫靜置5分鐘。c. 將DNA稀釋液和Lipofectamine 6G稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置20分鐘,形成Lipofectamine 6G復(fù)合物。Lipofectamine 6G復(fù)合 物在室溫下可穩(wěn)定存在6小時(shí)。3. 將Lipofectamine 6G復(fù)合物加入到接種好的細(xì)胞中,將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動(dòng),使復(fù)合物分散均勻。4. 在37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6小時(shí)后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時(shí)。5. 如果要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株,則在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后將細(xì)胞按照1:10或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中,第二天加入選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。備注:質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的優(yōu)化 為達(dá)到最高的轉(zhuǎn)染效率和降低細(xì)胞毒性的影響,可以對(duì)DNA和Lipofectamine 6G的比例以及細(xì)胞密度進(jìn)行優(yōu)化,一般在1:0.5~1:5的范圍內(nèi)優(yōu)化DNA (µg)和Lipofectamine 6G (µl) 的比例。
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