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R-PE 藻紅蛋白

簡要描述:R-PE 藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)出強烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。用常規(guī)的標記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結合起來制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細胞表面抗原檢測、流式細胞熒光測定等抗體熒光標記以及活體成像應用等診斷及生物工程技術。

  • 產品型號:78GD10007
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-11-30
  • 訪  問  量:2304

詳細介紹

品牌BIOHUB供貨周期兩周
應用領域生物產業(yè)
R-PE 藻紅蛋白產品描述
藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)出強烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。用常規(guī)的標記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結合起來制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細胞表面抗原檢測、流式細胞熒光測定等抗體熒光標記以及活體成像應用等診斷及生物工程技術。
R-PE 藻紅蛋白產品性質
分子量:約 240,000 道爾頓
組成:蛋白的亞基組成為(alpha-beta)6gamma。每個alpha-亞基和 beta-亞基約 20,000 道爾頓,每個
gamma 亞基約 30,000 道爾頓。
純度: Amax/A280 > 5.5
激發(fā)波長: :450-500 nm
發(fā)射 波長: :575 ± 5 nm
形態(tài):硫酸銨沉淀
產品特點
1、該產品為硫酸銨沉淀,將其置換至20mM 磷酸鹽緩沖液中使用。
2、在較寬的 pH 范圍內具有較寬的吸收光譜,比較容易選擇合適的激發(fā)波長,從而得到高效熒光發(fā)射,
且激發(fā)時有特異的熒光發(fā)射峰;
3、吸光度和熒光量子產率很高,熒光強而穩(wěn)定,靈敏度高;
4、具有較小的熒光背景,不易淬滅,熒光保存期較長;
5、易與其他分子交聯結合,非特異性吸附少;
6、chun天然海洋生物提取,無任何毒副作用,不含放射性,操作使用非常安全。易與抗體、生物su、
親合素、 免疫蛋白等物質結合,制成熒光探針。
使用方法
使用方法
抗體標記(僅供參考)
試驗材料:
藻紅蛋白:分子量約 240000 道爾頓;PD-10 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25M) ,安瑪西亞 Amersham公司產品,產品目錄號 No. 17-0851-01; NAP5 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25 DNA grade), 安瑪西亞Amersham 公司產品,產品目錄號 No 17-0853-02;琥珀酰亞胺-4-(N- 甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC),Pierce 公司,產品目錄號 No.22360;N-乙基馬來酰胺(NEM),Sigma 公司,產品目錄號 E-1271;二甲基亞砜(DMSO),Aldrich 公司,產品目錄號 No. 27,685-5。
試驗方法:
1、藻紅蛋白溶液
將藻紅蛋白沉淀復溶為溶液,用脫鹽柱或超濾管除鹽并將其緩沖液置換為20mM 磷酸鹽緩沖液,調整藻紅蛋白的最終濃度為5-10毫克/毫升。
2、藻紅蛋白的衍生化
將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無水二甲基亞砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻紅蛋白添加 11 微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)
(SMCC),鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應生成衍生化的藻紅蛋白。交換緩沖液預先平衡凝膠層析柱,將衍生化的藻紅蛋白過柱,收集藻紅蛋白峰。
3、抗體的處理
二硫蘇糖醇(DTT)溶解于蒸餾水中,配制成 1 摩爾/升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,調整抗體的濃度,使其濃度至少為 4 毫克/毫升。
每毫升抗體溶液中加入 20 微升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,室溫靜置反應 40 分鐘,將抗體的二硫鍵打開形成巰基。交換緩沖液預先平衡凝膠柱,將反應液過柱,收集抗體部分。
4、藻紅蛋白和抗體的共價交聯
每毫克抗體加入 3.2 毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅蛋白,鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的馬來酰亞胺基和抗體上的巰基實現共價交聯。
10 毫克的 N-乙基馬來酰胺(NEM)溶解于 1.0 毫升的無水二甲基亞砜(DMSO)中制成 N-乙基馬來酰胺(NEM)母液(現配現用)。每毫克抗體中加入 3.4 微升N-乙基馬來酰胺(NEM)母液,鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘, 反應后,使抗體上的巰基封閉。
5、交聯物的存儲
將交聯物于存儲緩沖液中透析后保存于2-8℃。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作!
本產品主要用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
運輸及保存方法
儲存條件:2-8°C 避光保存,勿冷凍。
穩(wěn)定性:在適宜條件下至少可以儲存12個月。

 

 

 

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