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Skim milk powder脫脂奶粉(WB專(zhuān)用)

簡(jiǎn)要描述:脫脂奶粉,脂肪含量低,蛋白含量高。配制成0.3~5%的水溶液使用。

  • 產(chǎn)品型號(hào):78CH10001
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2024-08-12
  • 訪  問(wèn)  量:136

詳細(xì)介紹

品牌BIOHUB供貨周期現(xiàn)貨
主要用途作為抗體反應(yīng)等的印跡封閉溶液使用應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè),制藥

western blot中脫脂奶粉的作用


封閉


原理:用非抗原的蛋白去封閉膜的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn),避免標(biāo)記抗體固定在膜上引起背景增高,常用的封閉液有BSA,脫脂奶粉,明膠, tween-20等,一般脫脂奶粉。


實(shí)驗(yàn)步驟:


5%脫脂奶粉(用1x TBS配制,或1xTBST配制)封閉一晚上 或室溫1~2小時(shí)


當(dāng)一抗為抗磷酸化抗體時(shí),脫脂奶粉由于含有較多磷酸化蛋白,請(qǐng)改為使用BSA。

2,一抗、二抗孵育

原理: 一抗可以與要檢測(cè)的蛋白特異結(jié)合,二抗可與一抗結(jié)合,同時(shí)二抗上帶有特異的酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP,堿性磷酸酶法AP等 ),標(biāo)記酶可以分解化學(xué)顯色底物產(chǎn)生有顏色的條帶或催化化學(xué)發(fā)光底物使膠片感光。

實(shí)驗(yàn)步驟:

一抗孵育:5%脫脂奶粉稀釋一抗到合適的濃度,與膜室溫孵育1小時(shí)或4度一晚上(抗體濃度及孵育時(shí)間需根據(jù)不同的抗體做相應(yīng)調(diào)整, 1xTBST,洗膜3次,每次5分鐘。

二抗孵育:5%脫脂奶粉稀釋二抗到合適的濃度,與膜室溫孵育1小時(shí), 1x TBST,洗膜3次,每次5分鐘。






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