當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > BIOHUB > 分子生物學(xué) > 78CH10001Skim milk powder脫脂奶粉(WB專(zhuān)用)
簡(jiǎn)要描述:脫脂奶粉,脂肪含量低,蛋白含量高。配制成0.3~5%的水溶液使用。
產(chǎn)品分類(lèi)
相關(guān)文章
Related Articles詳細(xì)介紹
品牌 | BIOHUB | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|---|---|---|
主要用途 | 作為抗體反應(yīng)等的印跡封閉溶液使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
western blot中脫脂奶粉的作用
封閉
原理:用非抗原的蛋白去封閉膜的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn),避免標(biāo)記抗體固定在膜上引起背景增高,常用的封閉液有BSA,脫脂奶粉,明膠, tween-20等,一般脫脂奶粉。
實(shí)驗(yàn)步驟:
5%脫脂奶粉(用1x TBS配制,或1xTBST配制)封閉一晚上 或室溫1~2小時(shí)
當(dāng)一抗為抗磷酸化抗體時(shí),脫脂奶粉由于含有較多磷酸化蛋白,請(qǐng)改為使用BSA。
2,一抗、二抗孵育
原理: 一抗可以與要檢測(cè)的蛋白特異結(jié)合,二抗可與一抗結(jié)合,同時(shí)二抗上帶有特異的酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP,堿性磷酸酶法AP等 ),標(biāo)記酶可以分解化學(xué)顯色底物產(chǎn)生有顏色的條帶或催化化學(xué)發(fā)光底物使膠片感光。
實(shí)驗(yàn)步驟:
一抗孵育:5%脫脂奶粉稀釋一抗到合適的濃度,與膜室溫孵育1小時(shí)或4度一晚上(抗體濃度及孵育時(shí)間需根據(jù)不同的抗體做相應(yīng)調(diào)整, 1xTBST,洗膜3次,每次5分鐘。
二抗孵育:5%脫脂奶粉稀釋二抗到合適的濃度,與膜室溫孵育1小時(shí), 1x TBST,洗膜3次,每次5分鐘。
產(chǎn)品咨詢(xún)
郵箱:xs1@78bio.com
地址:上海市浦東新區(qū)川沙新鎮(zhèn)6619號(hào)