BIOHUB的CCK-8試劑盒是用白色的WST-8固體粉末配置的,顏色為粉紅色,保存期更長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)重復(fù)性更好! WST-8(水溶性四唑(2-(2-甲氧基-4硝基苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),是一種類(lèi)似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的甲臜染料(formazan,下圖), 這種甲臜染料直接溶解在培養(yǎng)基中。水溶性四唑被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠。細(xì)胞增殖越多越快,則培養(yǎng)基的顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。正是利用這一特性開(kāi)發(fā)的CCK-8試劑盒直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。CCK-8法應(yīng)用非常廣泛,可以用于生物活性因子的活性檢測(cè),抗腫瘤藥物的篩選,細(xì)胞增值的測(cè)定,細(xì)胞毒性檢測(cè)以及藥敏等與細(xì)胞活性和增殖相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。本試劑盒使用方便,試劑盒包含一管已經(jīng)配制好的含有水溶性四唑的CCK-8溶液,即開(kāi)即用,無(wú)需其他準(zhǔn)備步驟。檢測(cè)過(guò)程也無(wú)需采用額外的步驟去溶解甲臜,可直接使用96孔板或者384孔板在酶標(biāo)儀上檢測(cè),適合大規(guī)模高通量的樣品檢測(cè)。
CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較
檢測(cè)方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差 需要加DMSO溶解 | 好 | 好 | 好 |
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開(kāi)即用 | 即開(kāi)即用 |
檢測(cè)靈敏度 | 一般 | 較高 | 較高 | 高 |
重現(xiàn)性 | 差 | 中等 | 好 | 非常好 |
檢測(cè)時(shí)間 | 較長(zhǎng) | 較短 | 較短 | 最短 |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細(xì)胞毒性 | 高 細(xì)胞形態(tài)wan全消失 | 很低 細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低 細(xì)胞形態(tài)不變 | 很低 細(xì)胞形態(tài)不變 |
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 非常差 | 一般 | 很好 |
批量樣品檢測(cè) | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度 | 一般,工作量大 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡(jiǎn)便,使用安全,重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無(wú)需有機(jī)溶劑和放射性同位素,步驟少,無(wú)損失,結(jié)果準(zhǔn)確!本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作 。無(wú)須使用同位素,所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測(cè)。
1.MTT實(shí)驗(yàn)生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來(lái)的誤差。
2.與MTT方法相比,本方法線性范圍更寬,靈敏度更高。本方法對(duì)細(xì)胞無(wú)損害,因此加入CCK-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)多次測(cè)定從而找到最佳測(cè)定時(shí)間。
3.本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)效果重復(fù)性好。
4.MTT具有毒性,同時(shí)其生成的甲臜需要有機(jī)溶劑溶解,會(huì)對(duì)操作人員身體造成危害。本試劑無(wú)毒,使用中無(wú)需有機(jī)溶劑,操作更加安全。
5.本試劑盒在4℃避光可長(zhǎng)期保存,使用無(wú)需配制,即開(kāi)即用。
6.酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾(扣除空白孔即可)
CCK-8溶液在避光,0-5℃的條件下可以保存一年; -20℃下保存2年;如需經(jīng)常使用請(qǐng)將試劑存放在0-5℃,為防止背景值增加干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)勿反復(fù)凍融。
1.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2.本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
78EA10004-100T | Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒) | 1ml/100T | BIOHUB |
78EA10004-500T | Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒) | 5ml/500T | BIOHUB |
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